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如何選擇DNA提取方法

 更新時(shí)間:2023-10-25    點(diǎn)擊量:632
  DNA的提取可以簡(jiǎn)單的分為裂解和純化兩大步驟,裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu),從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程,純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)分離的過程。那么該如何選擇DNA提取方法呢?讓我們一起來看看吧!
 
  一、酚氯仿抽提法
 
  酚氯仿抽提是去除蛋白質(zhì)的有效手段,但如果蛋白質(zhì)含量超過了其飽和度,裂解體系中的蛋白質(zhì)就不會(huì)被一次性去除,需要進(jìn)行多次反復(fù)抽提,而每次的抽提均會(huì)導(dǎo)致核酸的損失。酚氯仿抽提的優(yōu)勢(shì)是成本低廉,對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較低。二、高鹽沉淀法
 
  高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一個(gè)變種,其省略了酚氯仿抽提操作的麻煩,并且克服了酚氯仿抽提方法的缺點(diǎn),只是得到DNA的純度不夠穩(wěn)定。
 
  三、柱式法
 
  過柱法利用某些固相介質(zhì),在某些特定的條件下,選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質(zhì)及鹽的特點(diǎn),實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)及鹽的分離,是目前試劑盒提取廣泛使用的方法。
 
  離心柱法DNA提取它的優(yōu)點(diǎn)是比傳統(tǒng)的酚氯法提取的純度高,有利于RNA保護(hù),而且能進(jìn)行微量操作,以其低廉的價(jià)格和相對(duì)便捷的操作,漸逐取代了傳統(tǒng)DNA提取方法,被高??蒲兴仁袌?chǎng)普遍接受。
 
  四、磁珠法
 
  該方法將純化介質(zhì)包被在納米級(jí)的磁珠表面,通過介質(zhì)對(duì)DNA的吸附,在外加磁場(chǎng)的作用下使DNA附著于磁珠并定向移動(dòng),從而達(dá)到核酸與其它物質(zhì)分離的目的。磁珠法的優(yōu)勢(shì)是高質(zhì)量、高通量滿足如今對(duì)核酸提取效率的需求;靈敏度高(只需微量的樣本);分離速度快(磁場(chǎng)分離只需幾秒鐘);
 
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