細胞培養(yǎng)物污染往往是細胞培養(yǎng)實驗室中最常見的問題，有時會造成非常嚴重的后果。細胞培養(yǎng)污染物可分為兩大類，一類是化學污染物，如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質，包括內毒素、增塑劑和洗滌劑，另一類是生物污染物，如細菌、霉菌、酵母、病毒和支原體，以及其他細胞系的交叉污染。那么我們該如何分辨各種細胞污染呢？讓我們一起來看看吧！

一、細菌污染

肉眼觀察特點：細菌污染時細胞培養(yǎng)基可能在幾個小時呈現(xiàn)混濁，爆發(fā)很快。有時稍加震蕩，便會有很多混濁物漂起。

在低倍顯微鏡下，細菌以細小顆粒的形式出現(xiàn)在細胞之間，在高倍顯微鏡下觀察可以分辨出單個細菌的形狀。

二、真菌污染

常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、白色念珠菌和酵母菌。真菌污染時細胞培養(yǎng)液一般不會變渾濁，但在顯微鏡下可以觀察到各種形狀的菌絲。像念珠菌和酵母菌則會呈卵圓形散在細胞周邊和細胞之間。

肉眼觀察特點：真菌污染最短3天才能長出橢圓形的霉斑。霉斑往往會漂浮在培養(yǎng)液表面，隨著時間逐步擴大。真菌污染后，細胞生長變慢，最后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。真菌生長的比較慢，不那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。

三、病毒污染

組織細胞培養(yǎng)過程中，如果沒有除去潛在的病毒，就會產生病毒污染。目前，從原代猴腎細胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。

盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但生產疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

五、交叉污染

雖然不如微生物污染普遍，但許多細胞系與HeLa以及其他快速生長細胞系之間的廣泛交叉污染已經是一個明確的問題，會產生嚴重的后果。

在進行多種細胞培養(yǎng)操作時，所用器具要嚴格區(qū)分。

在進行換液或傳代操作時，注射器和滴管不要觸及細胞培養(yǎng)瓶瓶口，以免把細胞帶到培養(yǎng)液中污染其他細胞。

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