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takara一步法RT-qPCR說明書

 更新時(shí)間:2024-12-11    點(diǎn)擊量:138

一、產(chǎn)品目錄表

一步法RT-qPCR探針法檢測試劑盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)

品牌

Code No.

產(chǎn)品名稱

包裝量

價(jià)格(元)

Takara

RR600A

One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix

200 Rxns

詳詢

Takara

RR600B (A × 5)

One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix

200 Rxns × 5

詳詢

Takara

RR601A

One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG

200 Rxns

詳詢

Takara

RR601B (A × 5)

One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG

200 Rxns × 5

詳詢

 

 

 

image.png


二、產(chǎn)品特點(diǎn) 

· wanpremix型、操作簡單、probe法One Step RT-qPCR。
· zuo
的抗反應(yīng)阻礙物能力、粗提樣品可以使用本產(chǎn)品
· 新增UNG版本,可防止假陽性產(chǎn)生

■ 制品內(nèi)容

One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A,200次,25 μl反應(yīng)體系)

1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(2×)

625 μl × 4

2. RNase Free Water

1.25 ml × 2

3. ROX Reference Dye(50×conc.)*

100 μl

4. ROX Reference Dye II(50×conc.)*

100 μl


One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A,200次,25 μl反應(yīng)體系)

1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG(2×)

625 μl × 4

2. RNase Free Water

1.25 ml × 2

3. ROX Reference Dye(50×conc.)*

100 μl

4. ROX Reference Dye II(50×conc.)*

100 μl


* 使用Applied Biosystems Real-Time PCR儀器等,需要進(jìn)行孔與孔之間的熒光信號校正時(shí)添加該試劑。


◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的儀器
Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System
StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的儀器
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的儀器
Thermal Cycler Dice Real Time System系列
LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)


 

■ 制品說明


 image.png


反應(yīng)阻害物耐受實(shí)驗(yàn)











image.png 



圖1.阻害物耐受實(shí)驗(yàn)






在反應(yīng)液中添加5種反應(yīng)阻害物,分別使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix、Takara以往產(chǎn)品及其他公司的產(chǎn)品進(jìn)行阻害物質(zhì)耐受實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對添加各種阻害物質(zhì)和無添加組比較,Ct值之間的差值很小,顯示該制品對于各種阻害物具有很高的耐受性。






target

Human ACTB基因

探針

Takara qPCR Probe

 






image.png 



圖2.Multiplex反應(yīng)的再現(xiàn)性






以Human HeLa Cell Total RNA 1 pg~100 ng為模板,使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對ACTB、GAPDH、PPIA、YWHAZ基因進(jìn)行multiplex表達(dá)分析。對于所有目標(biāo)序列,滿足R2>0.99。




 






Standard



- Actin E = 97.1% R2= 0.996 Slope=-3.393 y-int=33.278



- YWHAZ E = 95.6% R2= 0.997 Slope=-3.433 y-int=35.528



- GAPDH E = 100.6% R2= 1.000 Slope=-3.307 y-int=35.400



- PPIA E = 97.1% R2= 0.999 Slope=-3.395 y-int=33.800





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